فروش کیت اندازهگیری کمی hsa-miR-23b-3p
جهت خرید کیت اندازهگیری کمی hsa-miR-23b-3p با کارشناسان ما جهت مشاوره رایگان در ارتباط باشید یا از طریق همین صفحه بصورت آنلاین خریداری فرمایید.
اجزای کیت اندازهگیری کمی hsa-miR-23b-3p
| جزء کیت | کاربرد |
|---|---|
| dNTP Mix | تأمین نوکلئوتیدهای موردنیاز برای سنتز cDNA |
| RNase Inhibitor | محافظت از RNA در برابر تخریب آنزیمی |
| Reverse Transcriptase | تبدیل miRNA هدف به cDNA |
| بافر 5X | فراهمکردن شرایط مناسب برای واکنش رونویسی معکوس |
| پرایمر اختصاصی Stem-loop RT | سنتز اختصاصی cDNA از hsa-miR-23b-3p بالغ |
| پرایمر Forward | تکثیر اختصاصی توالی hsa-miR-23b-3p |
| پرایمر Reverse | تکمیل واکنش تکثیر در مرحله Real-Time PCR |
| مسترمیکس اختصاصی دستگاه | انجام واکنش qPCR متناسب با مدل دستگاه اعلامشده |
سازگاری مسترمیکس با دستگاه
مسترمیکس Real-Time PCR بر اساس دستگاه مورد استفاده در آزمایشگاه انتخاب میشود. هنگام سفارش بهتر است مدل دستگاه اعلام شود تا مسترمیکس مناسب از نظر نیاز به رنگ مرجع و تنظیمات دستگاه در پکیج محصول قرار گیرد.
این موضوع برای دستگاههایی که به غلظت مشخصی از رنگ مرجع مانند ROX نیاز دارند اهمیت دارد.
معرفی hsa-miR-23b-3p
hsa-miR-23b-3p یکی از microRNAهای بالغ انسانی است که از ژن MIR23B تولید میشود. تغییرات بیان این miRNA در مطالعات مختلف مرتبط با تنظیم التهاب، پاسخهای ایمنی، مهاجرت و تهاجم سلولی و مسیرهای درگیر در پیشرفت تومورها بررسی شده است.
نقش hsa-miR-23b-3p میتواند بسته به نوع بافت، رده سلولی و شرایط آزمایش متفاوت باشد. به همین دلیل، اندازهگیری دقیق میزان بیان آن در نمونههای کنترل و آزمایش میتواند اطلاعات ارزشمندی درباره پاسخ سلولها به بیماری، دارو یا سایر تیمارهای آزمایشگاهی فراهم کند.
کاربردهای اصلی
- بررسی بیان hsa-miR-23b-3p در نمونههای انسانی
- مقایسه گروههای کنترل، بیمار و تیمارشده
- مطالعات التهاب و پاسخهای ایمنی
- تحقیقات مرتبط با بیماریهای خودایمنی
- بررسی مهاجرت، تهاجم سلولی و EMT
- مطالعات سرطان و بیومارکرهای مولکولی
- بررسی پاسخ سلولها به دارو یا تیمار
- تأیید نتایج RNA sequencing یا Microarray
- تحقیقات مربوط به تنظیم بیان ژن توسط microRNA
این محصول صرفاً برای مصارف تحقیقاتی ارائه میشود و برای تشخیص بالینی یا تصمیمگیری درمانی طراحی نشده است.
روش عملکرد کیت
- اندازه کوتاه microRNAها باعث میشود سنتز cDNA آنها به طراحی اختصاصی نیاز داشته باشد. در این کیت، سنتز cDNA با استفاده از پرایمر Stem-loop RT اختصاصی hsa-miR-23b-3p انجام میشود.
- پرایمر Stem-loop در مرحله رونویسی معکوس به فرم بالغ miRNA هدف متصل شده و امکان ساخت cDNA اختصاصی را فراهم میکند. واکنش سنتز cDNA با استفاده از آنزیم Reverse Transcriptase، بافر 5X، مخلوط dNTP و مهارکننده RNase انجام میشود.
- در مرحله دوم، cDNA تولیدشده با استفاده از پرایمر فوروارد اختصاصی، پرایمر ریورس و مسترمیکس متناسب با دستگاه Real-Time PCR تکثیر و اندازهگیری میشود. این طراحی به شناسایی اختصاصی فرم بالغ hsa-miR-23b-3p و کاهش تکثیر توالیهای مشابه کمک میکند.
ویژگیها و مزایای کیت
- طراحی اختصاصی برای فرم بالغ hsa-miR-23b-3p
- استفاده از روش Stem-loop برای افزایش اختصاصیت سنتز cDNA
- شامل معرفهای مرحله سنتز cDNA
- شامل پرایمرهای موردنیاز مرحله Real-Time PCR
- دارای آنزیم Reverse Transcriptase
- دارای RNase Inhibitor برای محافظت از RNA
- ارائه مسترمیکس سازگار با مدل دستگاه Real-Time PCR
- مناسب اندازهگیری نسبی بیان microRNA
- قابل استفاده برای RNA استخراجشده از نمونههای انسانی
- مناسب پروژههای سرطان، التهاب و ایمونولوژی
نمونههای قابل بررسی
پس از استخراج مناسب RNA، میتوان از این کیت برای نمونههای انسانی مختلف استفاده کرد، از جمله:
- سلولهای کشتشده
- بافت تازه یا منجمد
- بافتهای توموری
- سرم و پلاسما
- خون کامل
- نمونههای FFPE
- سایر نمونههای زیستی حاوی microRNA
کیفیت RNA، روش استخراج، مقدار اولیه نمونه و وجود مهارکنندههای واکنش میتواند بر نتیجه نهایی اثر بگذارد. برای نمونههای کممقدار مانند سرم و پلاسما، استفاده از روش استخراج اختصاصی small RNA اهمیت بیشتری دارد.
نحوه مصرف
ابتدا RNA یا miRNA از نمونه استخراج شود. در مرحله سنتز cDNA، RNA استخراجشده با پرایمر Stem-loop RT اختصاصی، dNTP Mix، بافر 5X، RNase Inhibitor و آنزیم Reverse Transcriptase ترکیب میشود.
پس از انجام واکنش رونویسی معکوس، مقدار مشخصی از cDNA همراه با پرایمر فوروارد، پرایمر ریورس و مسترمیکس اختصاصی دستگاه وارد واکنش Real-Time PCR میشود.
برای اندازهگیری نسبی بیان، مقدار Ct مربوط به hsa-miR-23b-3p با یک کنترل مرجع مناسب نرمالسازی شده و نتایج با روشهایی مانند ΔCt یا ΔΔCt محاسبه میشوند. حجم واکنش و برنامه دمایی باید مطابق دستورالعمل همراه کیت تنظیم شود.


دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.