Temed

تاریخچه

TEMED اولین بار در سال 1950 توسط محققان شرکت داروسازی Pfizer سنتز شد. با این حال، استفاده از آن به عنوان یک معرف برای الکتروفورز ژل تا دهه 1970 کشف نشد. در روزهای اولیه الکتروفورز ژل، محققان از پرسولفات آمونیوم به عنوان تنها آغازگر برای پلیمریزاسیون استفاده کردند.

با این حال، این روش دارای محدودیت‌هایی بود زیرا به غلظت بالایی از پرسولفات آمونیوم برای اطمینان از پلیمریزاسیون کامل نیاز داشت که می‌تواند منجر به آسیب به نمونه‌های ژل و پروتئین شود. افزودن این ماده به مخلوط پلیمریزاسیون راهی موثر برای کاهش غلظت پرسولفات آمونیوم مورد نیاز برای پلیمریزاسیون و همچنین افزایش سرعت و کامل بودن واکنش است.

انواع متفاوت Temed

تنها یک شکل از این ماده موجود است که یک مایع شفاف و بی رنگ با بوی آمین مشخص است. با این حال، تولید کنندگان مختلف ممکن است تغییرات جزئی در خلوص و غلظت داشته باشند.

اجزاء

جزء اصلی این ماده N,N,N’,N’-tetramethylethylenediamine است که یک مولکول آلی کوچک است که به عنوان یک کاتالیزور برای پلیمریزاسیون آکریل آمید و بی آکریل آمید عمل می کند.

موارد استفاده

TEMED در درجه اول به عنوان یک معرف برای الکتروفورز ژل استفاده می شود، جایی که به محلول ژل پلی آکریل آمید اضافه می شود تا پلیمریزاسیون آکریل آمید و بی آکریل آمید را آغاز کند. TEMED به عنوان یک کاتالیزور عمل می کند و با پرسولفات آمونیوم واکنش می دهد و رادیکال های آزاد تولید می کند که به نوبه خود پلیمریزاسیون آکریل آمید و بی آکریل آمید را آغاز می کند. این منجر به تشکیل یک ژل پلی آکریل آمید می شود که می تواند برای جداسازی پروتئین، تعیین توالی DNA و سایر کاربردها استفاده شود.

جدا از استفاده از آن در الکتروفورز ژل، TEMED همچنین به عنوان یک عامل کاهنده در برخی واکنش های شیمیایی مانند احیای 4-نیتروفنیل فسفات به 4-آمینوفنل استفاده شده است. علاوه بر این، نشان داده شده است که TEMED دارای برخی خواص ضد میکروبی است و در برخی کاربردهای پزشکی، مانند ترمیم زخم و به عنوان درمانی برای عفونت های باکتریایی استفاده شده است.

این ماده معمولاً در ترکیب با پرسولفات آمونیوم و آکریل آمید/بیس آکریل آمید برای تهیه ژل پلی آکریل آمید برای الکتروفورز پروتئین استفاده می شود. غلظت TEMED مورد استفاده در واکنش بسته به نوع ژل در حال تهیه و میزان پلیمریزاسیون مورد نظر می تواند متفاوت باشد. به طور معمول، غلظت های مختلف از 0.1٪ تا 0.5٪ استفاده می شود.

موارد احتیاط

اگرچه این ماده به طور کلی بی خطر در نظر گرفته می شود، به دلیل سمیت احتمالی آن باید با احتیاط رفتار کرد. این ماده محرک پوست و چشم است و در صورت خوردن یا استنشاق می تواند مضر باشد. هنگام کار با TEMED، استفاده از دستکش و عینک برای محافظت در برابر قرار گرفتن در معرض تصادفی توصیه می شود. در صورت تماس با پوست یا چشم، ناحیه آسیب دیده باید بلافاصله با آب شسته شود. همچنین مهم است که TEMED را در مکانی خشک و خنک و دور از منابع اشتعال نگهداری کنید، زیرا قابل اشتعال است.

کاربردها

TEMED به طور گسترده در الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید مورد استفاده قرار گرفته است و خواص آن آن را به یک جزء مهم در الکتروفورز ژل تحلیلی و آماده سازی تبدیل می کند. در اینجا برخی از کاربردهای این ماده آورده شده است:

1. تجزیه و تحلیل پروتئین: TEMED به طور گسترده در تجزیه و تحلیل پروتئین، به ویژه در جداسازی پروتئین ها توسط SDS-PAGE استفاده می شود. این به پلیمریزاسیون آکریل آمید و پیوند متقابل کمک می کند که منجر به تشکیل ماتریس ژل پلی آکریل آمید می شود. TEMED همچنین به شروع پلیمریزاسیون آکریل آمید و پیوند متقابل در فوکوس ایزوالکتریک کمک می کند، که برای جداسازی پروتئین ها بر اساس نقاط ایزوالکتریک آنها استفاده می شود.
2. تجزیه و تحلیل اسید نوکلئیک: TEMED در تجزیه و تحلیل اسید نوکلئیک برای جداسازی قطعات DNA توسط الکتروفورز ژل آگارز استفاده می شود. این به پلیمریزاسیون ژل آگارز کمک می کند و تشکیل یک ماتریس ژل یکنواخت را تضمین می کند.

3. کاربردهای دیگر: TEMED همچنین در تهیه بافرهای زیست شناسی مولکولی مانند TAE و TBE که در الکتروفورز استفاده می شوند، استفاده می شود. TEMED همچنین در سنتز دانه های پلی آکریل آمید و به عنوان یک کاتالیزور برای پلیمریزاسیون انواع خاصی از رزین ها استفاده می شود.

ملاحضات امنیتی

TEMED یک ماده خطرناک است و باید با احتیاط از آن استفاده کرد. می تواند باعث تحریک پوست، چشم و مجاری تنفسی شود. بنابراین، رعایت احتیاطات ایمنی لازم هنگام کار با این ماده ضروری است. در اینجا برخی از اقدامات احتیاطی وجود دارد که باید هنگام کار با آن رعایت شود:

1. از لباس های محافظ، از جمله دستکش، روپوش آزمایشگاهی و عینک ایمنی استفاده کنید.

2. برای جلوگیری از استنشاق بخارات آن، از TEMED در یک منطقه با تهویه مناسب استفاده کنید.

3. از تماس با پوست و چشم خودداری کنید. در صورت تماس بلافاصله با آب فراوان شستشو دهید.
4. TEMED را در مکانی خنک، خشک و دارای تهویه مناسب و دور از منابع حرارتی و اشتعال نگهداری کنید.

نتیجه

TEMED یک جزء ضروری در الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید است و خواص آن آن را به یک عنصر ضروری در این فرآیند تبدیل کرده است. اثربخشی آن در ترویج پلیمریزاسیون آکریل آمید و پیوند متقابل، آن را به یک عنصر ضروری در الکتروفورز ژل تحلیلی و آماده سازی تبدیل کرده است. با این حال، TEMED یک ماده خطرناک است و باید با احتیاط از آن استفاده کرد. رعایت احتیاطات ایمنی لازم هنگام کار با TEMED برای جلوگیری از هرگونه حادثه و اطمینان از ایمنی در آزمایشگاه ضروری است.

صفحات مرتبط:

لیست کامل مواد آزمایشگاهی

مشاهده این محصول در سایت Thermo Fisher